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程：    

蠟樣芽胞桿菌的測試片檢測方法

方法編號：CDC-5046 

1 適用范圍：用于各類食品以及人體體檢樣品中蠟樣芽胞桿菌的檢測。以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測需要。

2 方法原理：采用一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分，培養(yǎng)15～24小時就可確認(rèn)是否有目標(biāo)菌的存在。

3操作方法

3.1樣品處理：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，充分振搖或置均質(zhì)器中制成1:10的樣品勻液。

3．2接種：將測試片置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個樣品接種2片。

3．3 培 養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3．4結(jié)果判別: 對測試片進(jìn)行觀察，蠟樣芽胞桿菌產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點，而大部分非目標(biāo)菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。

4 附加說明

4．1 本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測，用取樣棉簽涂抹被測物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s，然后取1mL接種到測試片上。

4.2注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。

4．3出現(xiàn)陽性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗證，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗一次。